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龟鳖园地 |
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| 溶菌酶在龟鳖健康养殖中的科学应用 |
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文章来源： 发布时间：[2023-03-28] 已浏览 890 次 |
赵春光1 周晨2 潘宏涛3
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浙江杭州龟鳖研究所2、杭州天辰水产有限公司3、浙江艾杰斯生物科技有限公司）
龟鳖是我国传统的美食补品，我国人工养殖和食用龟鳖已有上千年的历史，所以养殖龟鳖不但是满足民众新时代美好生活的市场需求，也是我国新时代乡村振兴中发展乡村经济的特色高效项目之一。为了保证龟鳖产品高质量，要求在人工养殖过程中，特别是疾病防治措施中做到无有害残留的安全卫生，这就需要有新产品新方法来改变传统的做法。为此，介绍一种既能达到高效无害，又操作简便的新型龟鳖健康养殖新物质溶菌酶的科学应用，供养殖企业参考应用。
一、龟鳖用溶菌酶的作用机理
溶菌酶又称胞壁质酶或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶，是一种能水解细菌中黏多糖的碱性酶。溶菌酶主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复合体，使病毒失活。所以说，溶菌酶是一种能选择性溶解微生物细胞壁的酶，一种有效的抗生素替代品。
1、性状稳定环境要求低
溶菌酶纯品为白色或者微白色无定形粉末，无臭，味甜，易溶于水，不溶于丙酮、乙醚。常温保存。溶菌酶作用的适宜温度在35℃～50℃，适宜pH5.3～7.4，其水溶液在pH1.2～11.3之间稳定。溶菌酶具有较强热稳定性，在pH4～7时，80℃条件下处理5分钟、100℃条件下处理1分钟酶活仍然保持90%以上。溶菌酶为一种碱性蛋白质，常与氯离子结合成为溶菌酶氯化物，不会因为有机溶剂的处理而失活，不易被胃酸分解，性状稳定。
2、联用性广安全环保
溶菌酶具有良好的生物相容性，是乳酸菌、双歧杆菌等体内有益菌的增殖因子；和动物体内多元生物物质联合作用，增强免疫，抑杀多种病原菌。溶菌酶对于耐药性细菌有确切抑杀效果，与抗生素配伍使用能增效2-8倍，减少抗生素用量，有效控制药残。溶菌酶无毒、无害、无残留、无耐药性，符合绿色、安全、健康、环保要求。
无论是作为促进生长的内服添加还是防治疾病的外部应用，都非常简单易行。一般养殖户只经过一次培训和实地操作，基本都会操作。溶菌酶的应用成本也很，如宁波天地水产养殖公司在养殖有机甲鱼的过程中应用溶菌酶添加进行防病，用药成本比过去传统的方法降低12%。
通过有关研究和我们的实践表明，溶菌酶在龟鳖健康养殖应用中具有以下基本功能。
1、抗菌消炎功能
溶菌酶主要通过破坏细胞壁的β-1,4糖苷键，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌死亡，对革兰氏阳性菌、好气性孢子形成的菌、耐辐射微球菌均具有良好的分解作用，对大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、结核分枝杆菌和副血性弧菌等致病菌也具有明显溶解作用。溶菌酶可与各种诱发炎症的酸性物质结合，使其失活，并能增强其它药物的疗效。
2、抗病毒功能
溶菌酶在体内近于中性的pH环境下带有大量的正电荷，可与带负电荷的病毒蛋白直接作用，和DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使侵入体内的病毒失活；溶菌酶能激活宿主的免疫系统，增强肿瘤细胞的免疫原性，从而具有抗肿瘤作用，可以抑制流感病毒和腺病毒生长，阻止疱疹病毒感染。
3、增强免疫力功能
溶菌酶参与机体多种免疫反应，保持机体生理平衡，加强血清灭菌蛋白、γ-球蛋白等体内防御因子对感染的抵抗力，激发机体内吞噬细胞的噬菌作用；能诱导2型T辅助细胞反应，减少外来抗原的刺激，提高抗病力和生产性能。
4、调节肠道菌群平衡功能
溶菌酶能够抑杀肠道内有害微生物，促进有益微生物的生长繁殖，维护肠道菌群动态平衡，降低免疫应答和亚临床疾病的发生，降低霉菌毒素、氨、甲酚等有害物质对于机体免疫系统的损害，从而改善龟鳖的生产性能。
5、修复创伤组织功能
溶菌酶还具有激活血小板的功能，可以改善局部组织血液循环障碍，分解脓液，修复创伤组织，增强局部防卫功能。对动物生殖系统器官的修复及肠道粘膜修复等有较好的疗效。
6、与其他抗生素联用增效功能
溶菌酶与抗生素配伍具有极好的增效功能，其中与氨基糖甙类联用，增效2～4倍。 与四环素类联用，增效1～3倍。与β-内酰胺类联用，增效2～8倍。与大环内酯类联用，增效2～4倍。与喹诺酮类联用，增效0.5～2倍。
四、溶菌酶在龟鳖健康养殖中的应用现状
从1922年英国细菌学家亚历山大•弗莱明发现并命名溶菌酶以来，全球对溶菌酶的应用已广泛进入食品、日化、医药、保健、保鲜等领域。至目前，我国也在医学、食品、生物工程等领域进行深入的应用开发溶菌酶，并普及到陆生动物和水生动物的健康养殖，都取得了很好的效果。但因种种原因，在龟鳖的健康养殖中据不完全统计应用率只有22%，且坚持应用率不到10%，造成这种现状的主要原因有以下几点。
1、宣传推广力度不够认知差
虽然我国是全球最大的龟鳖养殖和应用生产国，综合养殖技术也走在世界先列。但因大多养殖模式和生产方式还秉承改革开放以来的惯用规程和措施，加之对新产品新技术的宣传力度不够，产品不为人知是主要原因。特别是行业内的一些交流会议场合，本来是最好的宣传机会，也因开会时各种与养殖有关的生产资料，如饲料，添加剂，生物制品和药物充塞会场，而且都是各说各好。即使有人宣传溶菌酶，也被繁杂的各种产品搞的无所适从。而那些本来养的不错，自我感觉更好的养殖企业和养殖户，就更难接受新观念，新技术与新产品了。
一项新产品从发现发明到应用，必须呈现从实验室到生产试验的每一步研究验证数据，推广才能有说服力。特别是不同养殖动物都有其不同的生态生物学特性，所以产生的实际应用效果也会存在差异性。但据了解，溶菌酶产品在推广宣传过程中当龟鳖养殖户提出要龟鳖试验应用数据时都拿不出来，或拿出一些陆生动物的试验数据来说明效果，养殖户不买账也在情理之中了。
养殖人对产品的直观要求是三点；一是能促进生长多少。二是防治疾病的实际效果如何，三是能增多少效益。如果对这三个作用不大甚至没有，就不会去考虑应用。但到目前为止，推广人员对产品的优势作用概念宣传较多，对直接或间接的效益评估很少。甚至到最后连推广人自己也不知道到底应用产品能增多少效。由于龟鳖在整个生长过程中影响其生长的因素很多，所以必须要有产品单因子影响的程度和增效之间的直接关系，并能做到增效结果的数据表明，应用者才会接受。而这种产品效果的应用增效试验与研究评估目前是缺乏的，这也是降低了龟鳖养殖企业对溶菌酶这种产品吸引力的主要原因。
五、溶菌酶在龟鳖健康养殖中的科学应用
市场上溶菌酶的应用制品很多，在龟鳖健康养殖中在我们的经验是用兽用和鱼用的原粉应用制品较好。通常以每克650万单位的含量（溶菌酶650万u/g）的为原粉。应用制品通常为每克50万单位（溶菌酶650万u/g）的小包装产品。在应用过程中可根据龟鳖的不同生长阶段和应用目标进行灵活配制。在应用实践上，我们根据溶菌酶的功能特性和龟鳖生态生物学特性分为促进健康生长、预防疾病和治疗疾病三个方面进行。
1、溶菌酶促进龟鳖健康生长的科学应用
通过添加溶菌酶调节龟鳖肠道菌群平衡，保持机体生理平衡，减少外来抗原的刺激，从而提高抗病力和生产性能，促进龟鳖健康生长。并采用日粮添加口服法，添加制品为每克50万单位的口服制成品，添加后的饲料按实际需要日量投喂。
（1）龟鳖苗种培育阶段，一般分为两期。第一期龟鳖规格在5克-250克小苗期间，每公斤饲料添加1克，一直添加到培育达到250克规格开始分养。第二期为龟鳖规格在251克-400克的幼种期间，每公斤饲料添加1克，每月添加2次，每次7天，添加时间在月初与月中。
（2）养成阶段，龟鳖规格在400克--750克之间的商品养成期间，每公斤饲料添加1克溶菌酶，每月投喂7天，时间在月初。
（3）亲种繁育阶段，龟鳖规格在750克以上的亲种的产卵期间，每公斤饲料添加1.2克溶菌酶，每月投喂7天，时间在月初。
为了提高效果，也可在溶菌酶的基础上同时添加一些多糖，多维类营养物质。值得注意的是添加时应避开高温膨化或熟化的加工工艺，在操作时应先溶于水后吸附到已加工好的投喂饲料上（图1）。
（图1）添加时应避开高温膨化或熟化的加工工艺
浙江湖州双林一带甲鱼养殖户从2006年开始使用溶菌酶，直到2017年拆迁，十年里全程养殖不用抗生素，养殖225天，每万只鳖苗养殖产量平均达到7600斤，最高达8000斤，取得了很好的经济效益。同样，山东省济宁宛庄中华鳖良种场用当地中华鳖黄河品系，在控温温室养鳖，放养密度为每平方米60只，养到3个月测定，养殖生长比往年不应用溶菌酶增产15%左右。后来通过测定和因素分析，认为主要是溶菌酶改善了消化道环境，促进了甲鱼的生长。
2、溶菌酶预防龟鳖疾病方面的科学应用-
溶菌酶预防龟鳖疾病分为预防体内疾病和体表疾病，体内疾病预防可参照日粮添加口服法的添加量和操作方法。
体表可用浸泡法和药浴法，浸泡法是指在龟鳖转塘或运输后下池前的龟鳖体表消毒，这项工序对于预防龟鳖体表疾病十分重要。具体操作方法是；
（1）龟鳖苗（指龟鳖规格在10克以内）下池前用溶菌酶原粉（650万单位/克）1克加水20公斤的消毒溶液，然后在光滑的大盆中浸泡10分钟。
（2）龟鳖幼种（个体规格在250克-400克）用溶菌酶原料粉（650万单位/克）1.5克加水30公斤的溶液中浸泡10分钟。
（3）龟鳖成体（含繁育亲种）用溶菌酶原料粉（650万单位/克）2克加水30公斤的溶液中浸泡10分钟。
上述龟鳖在浸泡时盆中水位要求没过体背就可，不用太多。一般一盆可浸泡三次，第三次浸泡后可把浸泡后的龟鳖连水一起倒入放养池中（图2）。
（图2）放养前鳖体用溶菌酶浸泡消毒
3、溶菌酶治疗龟鳖疾病方面的科学应用
因没有做好预防疾病措施，发现有疾病发生的养殖企业，就应积极治疗。如发现有肠炎或其他内脏有炎症，并还能吃食时，可用溶菌酶联合抗生素及时治疗。
方法是；每公斤饲料添加（50万单位/克）的制品2克，同时添加适量的抗生素制成药饵，按每天的日量投喂一周就可。
如是治疗体表损伤感染疾病，可用联合疗法进行药浴治疗，方法是；用溶菌酶制剂（650万单位/克）10克，外加氟本尼考5克/立方米的药浴水，装盆浸泡发病龟鳖20分钟，浸泡水位同样以没过龟鳖体背为宜，一般一盆药水浸泡三次，三次后龟鳖连同药水一起倒入放养池中，效果显著（图3）。
杭州湘湖生态鳖养殖场，2017年开始用上述方法防治中华草龟疾病，连续三年没发生过一次因病死亡。宁波天地水产养殖公司从1998年开始应用溶菌酶，商品在养殖期间不用任何抗生素，产品顺利获得有机认证，有机产品在市场的售价高出普通产品好几倍，取得了很好的经济效益。
（图3）用溶菌酶给龟体定期消毒
发表于科学养鱼2022年11期
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